I型胶原软骨修复凝胶类产品动物试验方案中，宜至少明确如下方面的试验设计信息：

一、植入周期

在小型动物（兔）模型，植入6～8周可以提供植入物存留、修复类型等方面的信息；在大型动物模型，8～12周的研究周期可以提供生物相容性、早期细胞反应以及缺损内植入物存留等方面的信息，如果要基于形态学和组织生物化学的基础行判断关节软骨修复或再生程度通常需要8～12个月的周期。

二、缺损部位

人体透明关节软骨损伤常发生在膝关节，因此宜在动物模型中使用膝关节评价软骨修复。股骨髁、滑车沟和胫骨平台，以及同一关节面不同解剖部位的受力状态和强度显著不同，滑车沟可作为承受不同于股骨髁的载荷和剪切力的评价部位。

三、缺损大小

通过使用合适的器械，移除软骨和骨组织，而不过多损伤周围组织，形成软骨（全层或部位厚度）或骨软骨（全层和跨骨的）缺损。在一个关节表面可形成多个缺损以评价一个以上的植入物，然而应考虑多个缺损的大小和位置，以及对周围组织的影响。对每种动物而言，临界大小的缺损定义为动物不经干预能修复的最大尺寸（直径）缺损，每种动物的临界缺损大小通常不同。一般情况下，I型胶原软骨修复产品动物试验中，缺损模型宜不小于该动物的临界缺损，但也不应超过关节面积的15%～20%，或髁宽度的50%～60%。

四、对照组设置

动物试验宜包括阴性对照（空白缺损）和/或其他对照。在有已获批准的I型胶原软骨修复产品时，动物试验宜包括上市产品对照组。更多的动物试验方案设计可以参考YY/T 0606.10《组织工程医疗产品 第10部分：修复或再生关节软骨植入物的体内评价指南》。

五、评价指标

（一）大体观察

定期观察手术切口的红肿、有无分泌物、切口有无裂开、愈合情况、动物术侧关节活动情况。损伤部位修复大体情况，包括颜色、质地、表面光滑度、修复厚度、与周围软骨的整合情况、关节滑膜是否有增生等指标。

（二）影像学检查

如有需要可考虑参考YY/T 1636 《组织工程医疗器械产品再生膝关节软骨的体内磁共振评价方法》，通过影像学检查软骨及软骨下骨的修复再生情况。MRI无创性检查可用于体内软骨修复进度的监测。

（三）组织学切片

术后需设置不同的取材点，每个取材点试验组及对照组各取材至少6例，取出术侧关节，组织学切片染色进行新生软骨的定性及定量的检测，以及软骨下骨的修复再生情况。

（四）修复效果评分

采用国际软骨修复协会（ICRS）评估标准或改良的Wakitani评分法，按指标观察修复组织大体情况、基质染色、修复面积、软骨厚度及与正常组织的整合情况。分别计算试验组及对照组所有实验动物评分均值，进行统计学分析。

（五）免疫组化

观察点取材时可进行Ⅱ型、I型和X型胶原及蛋白聚糖的免疫组化染色，观察软骨再生情况，同时结合组织形态学结果，评价再生软骨组织肥大化和纤维化的情况。

（六）力学检测

观察点取材时进行聚集模量、动态刚度、泊松比、渗透性与摩擦系数等力学检测。

（七）糖胺聚糖 （GAG）含量检测

将力学测定的样品回收，取其修复区域软骨组织进行GAG含量检测，GAG含量检测参照YY/T 1810 《组织工程医疗产品 用以评价软骨形成的硫酸糖胺聚糖(sGAG)的定量检测》。

（八）免疫学指标

选择适当的观察点进行局部组织的免疫学检查，以及血生化的全身免疫学检查。

（九）安全性指标

动物试验研究中，建议对相关的不良事件进行观察。