液体石蜡保藏法实际上是斜面保藏法的一种改进形式。它的原理基于斜面保藏菌的基础上，覆盖一层液体石蜡，创造缺氧环境而保存于4℃。对于安徽省六安市无菌检验员培训学员来说，液体石蜡保藏法是务必要学习掌握的知识和技能，一起看正文。
安徽省六安市无菌检验员培训知识之液体石蜡保藏法
1.液体石蜡保藏法
(1)准备液体石蜡
根据需要，将液体石蜡进行分装密封，放置于高压蒸汽灭菌锅内121℃灭菌30min，灭菌完成后放置于40℃恒温箱中蒸发水分，约4天，或105℃烘箱中1h，待水分蒸发完全后，备用。
(2)制备斜面菌种
参看之前文章讲到的内容。
(3)封液体石蜡
将无菌干燥的液体石蜡注入上述培养好的斜面上，加入石蜡的量以高于斜面顶端1cm为宜，再将试管密封，直立于4℃左右冷藏保存。
覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱代谢作用。要定期添加石蜡保证斜面处于液面以下。
(4)保藏时间
保藏时间至少可以达到1年，甚至更长。
一般情况，不产芽孢细菌保藏1年，芽孢菌、放线菌、霉菌可保藏2年，酵母菌可保藏1-2年。
(5)对象
细菌，酵母菌，放线菌等。
(6)优点
保藏时间较斜面保藏法长，操作简便。
(7)缺点
需要直立放置，比较耗费空间，不便于携带。
2.液体石蜡保藏菌种活化
将保藏的斜面取出来，用接种环从液体石蜡下挑取少量菌种，适当在试管内壁轻点几下，减少石蜡量，然后采用划线法接种于新鲜平板上培养，待生长良好，再次传代，培养。
3.注意事项
(1)液体石蜡易燃，必须注意火灾。
(2)移植菌种时，接种针上带有石蜡和菌体，火焰灭菌时易飞贱、爆发，严防感染。
(3)由于取出的菌种带有一定量的液体石蜡，生长较慢且有粘性，因此，需要传代2次。
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