平板涂布法
将供试液涂布在琼脂平板的表面,经培养后计数表面生长的菌落数,是平板菌落计数的另一种方法。本法使细菌不必经受溶化琼脂热力的影响,因此平板涂布法所测得的结果比倾注平板法为高。生长在琼脂表面的菌落易于观察也是本法的优点。但由于接种(涂布)量较小(0.05~0.2ml),对含菌量的样品,本法可能不够准确。本法在日本药局方十三改正版中收载。
设备和材料 同平板菌落计数法(倾注法),另需准备涂布样品用的玻璃棒,(L 形,长约20cm,直径3.5 mm,在棒前端3cm处弯成直角,两端烧圆)。营养琼脂平板需事先准备,即已灭菌的营养琼脂,冷却至适宜温度时,倾注约15 ml 至灭菌平皿中,待凝固后将平板放50℃ 1.5~2h,使琼脂表面干燥。
方法∶按平板菌落计数法制备供试液及稀释液,可根据供试品染菌情况确定稀释级的选择。用一支灭菌吸管(0.1ml刻度),取0.1 ml待检供试液加至营养琼脂表面,立即用灭菌的L玻棒在表面均匀涂布,注意勿划破琼脂,对菌落观察不利。每一个平板分别用1支L棒。经涂布的平板至少需 15min,使其表面干燥同平板菌落计数法培养、计数规则,按供试液的稀释倍数和接种量计算菌落结果。