根据细菌对氧与二氧化碳需要的情况,有以下几种不同的培养方法:需氧培养法、厌氧培养法、微需氧培养法、二氧化碳培养法。
二氧化碳培养法 某些细菌,例如布鲁菌等,需在5%~10%的 CO2环境中培养。在药品的细菌检验中,若对某种营养性的动物脏器制剂检出大量的金黄色葡萄球菌,并怀疑产有引起急性胃肠炎的肠毒素时,可将该菌种于肉汤培养基内,置 CO2环境中培养,获取肠毒素,供作动物试验。
二氧化碳培养法如下∶
(1)二氧化碳培养箱法∶就是把接种过的培养基置于二氧化碳培养箱内培养,此为目前最佳的二氧化碳培养法。该箱内的CO2由外部输入,外部是一个装有CO2的钢瓶。箱内的CO2含量和温度,均能自动调节,使用方便,效果良好。
(2)烛缸法∶此即微需氧培养法中的烛缸法。因燃烛自行熄灭时,缸内约有5%~10%的CO2,供作培养。
(3)化学法∶是利用干燥缸或磨口标本缸进行。在缸口与盖口涂匀凡士林后,分别将重碳酸钠与浓盐酸置于缸底,用量按缸的容积计算,每 L容积用重碳酸钠0.4g与浓盐酸 0.35 ml。置入接种过的培养基,立即盖严密封。接着稍稍将缸倾斜,使重碳酸钠与浓盐酸接触,约可生成5%~10%的CO2,置37℃培养。
烛缸法和化学法,均可在缸内放一管 CO2指示剂,即溴麝香草酚蓝指示剂,按0.1%碳酸钠水溶液 100 ml 中加入0.5%溴麝香草酚蓝溶液 2 ml 即配成。此指示剂在不同浓度的CO2环境中,可呈现不同的颜色。无CO2时呈蓝色;5%CO2时呈蓝绿色;10%CO2时呈绿色;15%CO2时呈绿黄色;20%CO2时呈黄色。显色反应约需1h才能稳定。