对于山东省无菌检验员培训学员来说，金黄色葡萄球菌检测理论和操作是应知应应会事项。本文先为大家说说金黄色葡萄球菌定性检验注意事项，一起看正文。

山东省无菌检验员培训知识之金黄色葡萄球菌定性检测注意事项

1.7.5%氯化钠肉汤增菌培养：

（1）若样品本身在均质后清澈，培养18h观察呈现一定程度的浑浊（与培养前相比），则接种平板；若18h后仍无变化，继续培养至24h后无论浑浊与否都接种至平板；

（2）若样品本身在均质后浑浊，则直接培养至24h后再接种平板。

2.血平板：36±1℃培养18h后观察，若有菌落生长或有菌落生长的迹象（无论是否溶血），则应酌情配制NA、BHI并分装至小试管中（NA 10mL/管、BHI 5mL/管）、灭菌后NA应斜放凝固成琼脂斜面备用。至血平板培养至24h取出，挑取菌落进行革兰氏染色镜检，同时挑取菌落接种至NA斜面、BHI肉汤管，36±1℃培养24h。

3.接种原则：

（1）革兰氏染色后还剩余10个或10个以上菌落，则NA、BHI分别接种5管；

（2）若多于5个（不包括5个）不足10个，则BHI接种5管，剩余的接种NA；

（3）5个及以下则全部接种BHI，不接种NA。

4.BP平板：

36±1℃培养24h后观察，有菌落生长则取出，无菌落生长则继续培养至48h后再观察。若血平板已挑取菌落进行证实试验，则不必再挑取BP平板上的菌落进行实验。若血平板上无菌落生长，则应在24h～48h内逐步观察BP平板是否长菌或有无长菌迹象，有则需配置BHI及NA，挑取BP上的菌落进行纯化、增菌，36±1℃培养24h。 

5.血浆凝固酶试验：

（1）根据BHI管数，取冻干血浆粉，每瓶用移液枪加入0.5mL生理盐水，使其充分溶解，再换移液枪枪头取0.3mLBHI培养物加入其中（每管BHI用1个枪头），振荡摇匀后于36±1℃培养，计时，每30min观察一次，如呈现凝固（将试管倾斜或倒置时出现凝块）或半凝固（一般的液体呈现凝固）则判定为阳性。若一直不凝固，则一直观察，直至观察至6h（查看12次）还未凝固，则试验终止，判定为阴性结果；若中途出现完全凝固或半凝固，则试验终止，判定为阳性结果。

（2）同时取金黄色葡萄球菌标准菌株（ATCC 6538以及CMCC（B）26003各一支）制成菌悬液后作为阳性对照、以灭菌生理盐水为阴性对照，分别接种至BHI中同步培养后进行血浆凝固酶试验。

（3）若血浆凝固酶试验结果可疑，则挑取NA上的菌落接种BHI再次进行试验。

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