上一篇文章为大家讲解了菌种斜面保藏和活化方法，今天继续来为安徽省蚌埠市无菌检验员培训学员讲解另外一种菌种保藏和活化方法，即甘油管保藏法和活化，一起看正文。
安徽省蚌埠市无菌检验员培训知识之菌种甘油管保藏法和活化
1.甘油管保藏法操作步骤
甘油管保藏是实验室常用的菌种保藏方法，它的原理在于，一定浓度的甘油，可以降低水的结冰温度，有效地防止细胞内部形成冰晶，甘油还可以与细胞内部分子结合，从而形成细胞的保护层，起到保护细胞的作用。此外，甘油还是一种有机碳源，可以为细胞提供一定量的碳源和能源，使其保持活力状态。参考复习笔记9：微生物的营养成分和培养基类型
甘油比较粘稠，一般采用质量比配制即可。
甘油管保藏法中，甘油的终浓度20%-30%即可。
值得注意的是，配好后一定要混匀，甘油密度比较大，会沉淀到底部，如果不混匀，灭菌效果可能不太好。
(2)甘油管保藏
液体菌种：将培养好的液体菌种和甘油按比例混匀，一般甘油的终浓度20%-30%。
我一般使用50%甘油和菌液1:1混匀，-80℃保藏即可。
平板或斜面菌种：用无菌水重悬菌种后，与50%甘油1:1混匀，-80℃保藏即可。
通常使用甘油的终浓度在20%~30%，该范围外的浓度会对细胞产生毒性，质粒会很容易丢失，甘油浓度太低起不到作用，太高又会影响菌种活性。
一般保藏时间为一年。在实际操作中，一年以上也没问题。将甘油管从-80℃取出，融化后，直接用接种环挑取一环，采用划线法在固体培养基上划线，适宜温度下倒置培养即可。或者用无菌水适当稀释后涂布至平板培养基中，培养。
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