染色方法∶
①背景染色法∶用0.01%孔雀绿染色液2~4ml,轻倒在滤膜上,经8~10s,再小心除去多余染色液。此时滤膜为绿色,而菌落呈白色或黄色。
②菌落染色法∶1%(W/V)亚甲蓝乙醇溶液300 ml与0.01%(W/V)的氢氧化钠溶液1000 ml 混合成染色液。然后将新鲜吸湿的海绵,置于干净平皿中,加入1.8ml的染色液,再将滤膜放置在海绵上,经15 min 取出。此时滤膜呈深蓝色,菌落呈浅蓝色。
须注意用于计数的滤膜,直径要大,最好有方格便于计数,此型滤膜我国已有生产。此外,遇有抑菌药物时,冲洗次数须2~3 次,冲洗液量要多,每次约50~100 ml。