梯度稀释法是将待分离微生物样品经过一系列梯度(一般10倍递增)稀释后,使微生物菌体充分分散,成为单细胞,然后再取出一定量,涂布到固体培养基表面的方法,再经过适宜的培养条件,形成单菌落的过程。梯度稀释法是金华无菌检验员培训基础知识,大家一定要掌握哦。
金华无菌检验员培训之梯度稀释法
以十倍梯度稀释为例,梯度稀释法的步骤如下:
1.称量:准确称取待测样品1g或量取待测样品1mL。
2.稀释:将上述样品放入装有99mL无菌生理盐水(有小玻璃珠)的250mL三角瓶中,记录。
3.摇匀:将上述三角瓶放置于摇床上振荡30min,使微生物细胞充分分散,静置20-30s,即成10-2稀释液。
4.继续稀释:再用1mL无菌移液器,吸取上述稀释液1mL,移入装有9mL无菌水的试管中,吹吸3次,让菌液和水混合均匀,即成10-3稀释液。
5.继续稀释:再换一支无菌移液器,吸取10-3稀释液1mL,移入装有9mL无菌水的试管中,吹吸3次,即成10-4稀释液。
6.继续稀释:以此类推,连续梯度稀释,制成10-7、10-8、10-9 等一系列稀释菌液。
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