对于无菌检验员培训内容来说,大家可能经常听到阳性对照、阴性对照、空白对照等名词,对照是无菌试验得出可靠结果的重要方法之一。本文为大家说说什么是对照试验。
1.阳性对照
阳性对照应根据供试品特性选择阳性对照菌:无抑菌作用及抗革兰阳性菌为主的供试品,以金黄色葡萄球菌为对照菌;抗革兰阴性菌为主的供试品以大肠埃希菌为对照菌;抗厌氧菌的供试品,以生孢梭菌为对照菌;抗真菌的供试品,以白色念珠菌为对照菌。阳性对照试验的菌液制备同方法验证试验,加菌量不大于100cfu,供试品用量同供试品无菌检验每份培养基接种的样品量。阳性对照管培养不超过5天应生长良好。
2.阴性对照
供试品无菌检验时,应取相应溶剂和稀释液、冲洗液同法操作,作为阴性对照。阴性对照不得有菌生长。
3.稀释液、冲洗液及其制备方法
稀释液、冲洗液配制后应采用验证合格的灭菌程序灭菌。
(1)0.1%无菌蛋白胨水溶液 取蛋白胨1.0g,加水1000mL,微温溶解,必要时滤过使澄清,调节pH值至7.1±0.2,分装,灭菌。
(2)pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液 取磷酸二氢钾3.56g,无水磷酸氢二钠5.77g,氯化钠4.30g,蛋白胨1.0g,加水1000mL,微温溶解,必要时滤过使澄清,分装,灭菌。
(3)根据供试品的特性,可选用其他经验证过的适宜的溶液作为稀释液、冲洗液。(如0.9%无菌氯化钠溶液)
如需要,可在上述稀释液或冲洗液的灭菌前或灭菌后加入表面活性剂或中和剂等。
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