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微生物实验技术之消毒与灭菌(十)
发布时间:2021-12-30浏览:894

常用的灭菌方法-热力灭菌法-湿热灭菌法

湿热灭菌法 通过热蒸汽或沸水使细菌蛋白质变性而杀灭微生物的方法,称湿热灭菌法。湿热的穿透力比干热强,所以湿热灭菌效果较干热好。

(1)煮沸灭菌:是加热使水至沸而杀灭细菌的方法。凡不适于高压蒸汽灭菌的物品。可在常压下在水中煮沸(100℃)一段时间达到灭菌。如在水中加2%碳酸钠煮沸(温度可提高至105℃)20 min,非芽孢菌和多数芽孢菌皆可被杀灭,但少数抵抗力极强的芽孢仍可能存活。

(2)流通蒸汽灭菌:在常压下,用蒸锅、蒸笼等,在100℃灭菌,故仅可杀死细菌繁殖体,不能完全杀灭芽孢。

亦可用间歇灭菌,即在常压下的蒸汽灭菌后,取出灭菌物,置常温过夜,使其中残存的芽孢萌发成繁殖体,然后再用蒸汽灭菌,如此反复三次,即可达到完全灭菌。每次灭菌时间,依被灭菌物体的大小、数量而定,一般从0.5h至2h。本法适用于高温下可能变质的物品、营养物、培养基等,但较费时。

3)高压蒸汽灭菌:高压蒸汽灭菌为最可靠、最适用、最广泛的灭菌方法。凡耐高温和潮湿的物品,如培养基、衣服、敷料、玻璃器材、传染性污物可应用本法灭菌,接种及培养后的实验器物也常经高压蒸汽灭菌后,再行洗涤或弃去。高压蒸汽灭菌需要一定的设备,即高压蒸汽灭菌器。在常压下,水的沸点为100℃,随着压力变化,水的沸点也在变化,在高于常压情况下,水的沸点可高于100℃,反之亦然。高压湿热灭菌就最通过加压提高蒸汽温度,用高压蒸汽灭菌,穿透力强,温度高,灭菌效果最好。它是简便、经济、可靠、无毒的安全灭菌方法。使用高压蒸汽灭菌应按要求操作,须特别注意安全可靠。