接种技术
接种的技术方法有多种,根据接种的目的和使用的培养基不同,分别采用。接种时经常使用的接种环或接种针,在每次使用的前后均应烧灼灭菌。有的接种技术,要用无菌吸管或无菌注射器进行。所有的接种技术方法,基本的程序相同,即接种环烧灼并冷却或无菌吸管→沾取培养物或吸取样品稀释液→接种培养基中(包括拔塞或开盖,接种后立即塞塞或盖盖)→接种环烧灼后放置或吸管置于消毒液中。
半固体培养基接种法 接种半固体培养基,用于观察细菌的动力或保存菌种。持接种针沾取菌落或菌液,向培养基表面中央直刺至管底,(切不可将接种针在培养基内左右移动),再按原路线退出,即成。此种技术称为穿刺接种法。培养后,有鞭毛的细菌,沿穿刺线向四周扩散生长,可被观察到,显示有动力。
对作鉴别试验用的明胶、葡萄糖半固体等培养基,也用穿刺接种。但对醋酸铅培养基是在管的内壁穿刺接种2~3次,利于观察培养结果。
对既作纯培养,又作生化初筛的 TSI和 KIA琼脂,因其为高层斜面,如上述用接种针从平板上沾取可疑菌的单个菌落,从斜面正中垂直穿刺种人至管底,再由原路退出,在斜面上蜿蜒划线接种,但勿使针尖划破斜面。对此种高层斜面的接种,也可先在斜面接种,再向底层穿刺。